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熒光分光光度計和酶標儀的相同點和不同點

點擊次數:42 發布時間:2022-09-20

熒光分光光度計和酶標儀的相同點和不同點

分光光度計和酶標儀都是實驗室常用的兩種儀器,它們的測定原理是相同的,測定的都是樣本的吸光度。

酶標儀按照功能的不同劃分,可以分為(1)光吸收酶標儀(可見酶標儀,紫外/可見酶標儀)(2)熒光酶標儀(3)化學發光酶標儀。

分光光度計按照波長及應用領域的不同可以分為:(1)可見光分光光度計(2)紫外分光光度計(3)紅外分光光度計(4)熒光分光光度計(5)原子吸收分光光度計。

分光光度計和酶標板存在一些不同之處,具體差別體現在以下三個方面:

(1)盛裝待測溶液的容器:

分光光度計用的是比色皿,酶標儀使用的是塑料微孔板(酶標板)。比色皿只能起到盛裝溶液的作用,每個比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標板常用透明的聚乙烯材料制成,對抗原抗體有較強的吸附作用,因此用它作為固相載體,酶標板通常為48孔或96孔,每個微孔可以盛裝不同的溶液。

(2)光路的方向:

分光光度計是水平光路,而酶標儀則是垂直光路。由于酶標板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。垂直光的特點是標本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液面是否水平、酶標板透光性、孔底是否平整等的影響較大。

(3)光路的長度:

由于光密度(od值)與吸光系數,

待測組分的濃度以及光路長度成正比關系。

分光光度計采用的比色杯的寬度通常是1cm,所以光路長度固定為1cm。因此不同儀器,不同批次測量的數據具有同樣的可比性。

而酶標儀采用的是垂直光路,

所以光路的長度應該是液體液面的高度。所以測得的值受到樣品的體積的影響。


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