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熒光分光光度計注意事項

點擊次數:29 發布時間:2022-09-20

熒光分光光度計注意事項

a. 請注意愛護液體比色皿,特別是測試有機樣品的同學請在測量完畢后用有機溶劑清洗,干燥后再放入盒子中,否則會造成比色皿表面嚴重污染,影響透光度。

b. 固體樣品池僅剩一個,測試完畢請物歸原處。

測試完畢請注意登記,關閉儀器。

分子吸收、熒光、磷光輻射躍遷

無輻射躍遷——去活化過程

處于激發態分子不穩定,通過輻射或非輻射躍遷等去活化過程返回至基態 。這些過程包括:

1)振動弛豫

在液相或壓力足夠高的氣相中,處于激發態的分子因碰撞將能量以熱的形式傳遞給周圍的分子,從而從高振動能層失活至低振動能層的過程,稱為振動弛豫。

2)內轉換

對于具有相同多重度的分子,若較高電子能級的低振動能層與較低電子能級的高振動能層相重疊時,則電子可在重疊的能層之間通過振動耦合產生無輻射躍遷。

定性分析

任何熒光都具有兩種特征光譜:激發光譜與發射光譜。它們是熒光定性分析的基礎。

1)激發光譜

改變激發波長,測量在zui強熒光發射波長處的強度變化,以激發波長對熒光強度作圖可得到激發光譜。

激發光譜形狀與吸收光譜形狀完全相似,經校正后二者完全相同!這是因為分子吸收光能的過程就是分子的激發過程。

激發光譜可用于鑒別熒光物質;在定量時,用于選擇zui適宜的激發波長。

2)發射光譜

發射光譜即熒光光譜。一定波長和強度的激發波長輻照熒光物質,產生不同波長的強度的熒光,以熒光強度對其波長作圖可得熒光發射光譜。

由于不同物質具不同的特征發射峰,因而使用熒光發射光譜可用于鑒別熒光物質。

使用熒光光度計檢測熒光信號時,比色皿使用完畢要用有機溶劑清洗干凈,防止比色皿污染導致測量值不準確,此外實驗結束后,要將清洗好的比色皿干燥后再保存。


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